杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建

编号 zgly0001295303

文献类型 期刊论文

文献题名 杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建

作者 刘威生  冯晨静  杨建民  刘冬成  张爱民  李绍华 

作者单位 中国农业大学农学与生物技术学院  河北农业大学  中国科学院遗传与发育生物学研究所  中国科学院植物研究所 北京100094 辽宁省果树科学研究所  辽宁熊岳115009  河北保定071001  北京100101  北京100093 

母体文献 果树学报 

年卷期 2005年06期

年份 2005 

分类号 S662.2 

关键词 杏  ISSR(inter-simple sequence repeat)  反应体系  退火温度  优化 

文摘内容 以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系为:20μL的反应体系中含10ng模板DNA、0.1mmol/LdNTP、0.25μmol/LPrimer、2.5mmol/LMg2+,0.5UTaqPolymerase。适宜退火温度为50-52.1℃。用引物UBC825和UBC868〔序列为(GAA)5〕在优化的反应条件下建立了5个种12份杏材料的ISSR指纹图谱。