柳杉CAPS遗传标记反应体系的优化

编号 zgly0000392429

文献类型 期刊论文

文献题名 柳杉CAPS遗传标记反应体系的优化

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 杨萍  郑前剑  赵明水  汤定钦 

作者单位 浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室  浙江省天目山国家级自然保护区管理局 

母体文献 浙江林学院学报 

年卷期 2006,23(1)

页码 52-55

年份 2006 

分类号 S718.43  Q523 

关键词 植物学  柳杉  切割的扩增产物多态性序列(CAPS)  DNA标记  反应体系  优化 

文摘内容 建立柳杉Cryptomeria fortunei CAPS反应优化体系是进行柳杉遗传多样性研究的前提。通过对影响柳杉CAPS遗传标记反应体系结果主要因子的研究, 确定了最佳的柳杉CAPS扩增反应体系: 含有2.0μL 10×Buffer, 0.08mmol·L^-1dNTPs, 200mg·L^-1铸型DNA, 1.5mmol·L^-1MgCl2, 0.1μmol·L^-1引物和41.675nkat Taq DNA聚合酶的20μL反应液。扩增程序是94℃预变性5min, 然后94℃变性40s, 58℃退火40s, 72℃延伸80s, 共35个循环, 然后在72℃延伸5min。PCR产物10.0μL, 加入2.0μL10×Buffer, 83.350nkat内切酶, 7.5μL双蒸水构成20μL酶切反应体系。