奶山羊POU1F1基因CDs区的克隆、分析及原核表达

编号 zgly0001390184

文献类型 期刊论文

文献题名 奶山羊POU1F1基因CDs区的克隆、分析及原核表达

作者 李建华  罗军  张晓  樊睿  王伟  郝娟  赵旺生 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 Q785 

关键词 关中奶山羊  POU1F1  克隆  生物信息学分析  原核表达 

文摘内容 【目的】克隆奶山羊垂体特异性转录因子POU1F1基因CDs区,并对其进行生物信息学分析和原核表达。【方法】采集关中奶山羊垂体组织,提取其总RNA,根据绵羊POU1F1基因序列,利用反转录RT-PCR克隆POU1F1基因CDs区,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体pET-32a-POU1F1,在大肠杆菌BL21（DE3）pLysS中进行表达。【结果】关中奶山羊POU1F1基因（GenBank登陆号:FJ547813）开放读码框由876个碱基组成,编码291个氨基酸,基中包含1个POU-specific结构域（从第124～198个氨基酸）和1个Homeobox结构域（从第214～276个氨基酸）;奶山羊POU1F1基因CDs区核苷酸序列与绵羊（NM001009350）、牛（NM174579）、人（NM000306）和小鼠（NM008849）的同源性分别为98%,97%,91%和86%,其氨基酸序列与绵羊、牛、人和小鼠的同源性分别为98%,98%,96%和92%;成功构建了重组质粒pET-32a-POU1F1的原核表达系统,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白His-POU1F1。【结论】POU1F1基因编码的功能氨基酸在奶山羊、绵羊、牛、人和小鼠上高度保守,推测奶山羊POU1F1基因与其他物种的POU1F1基因具有相似的功能。