红花种子cDNA文库构建及脂肪酸代谢相关基因的克隆

编号 zgly0001497659

文献类型 期刊论文

文献题名 红花种子cDNA文库构建及脂肪酸代谢相关基因的克隆

作者 杨莹  王沥浩  邹德毅  王清曼  强卫东  许心怡  陈伟  王凯  杨晶 

作者单位 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2015年11期

年份 2015 

分类号 S567.219 

关键词 红花种子  cDNA文库  克隆 

文摘内容 【目的】构建红花种子cDNA文库,挖掘红花脂肪酸代谢途径相关基因,为红花品质改良的基因工程研究奠定基础。【方法】以红花成熟种子为材料,通过Trizol法,提取红花种子总RNA,使用GeneRacer?Kit和CloneMinerⅡcDNA Library Construction Kit试剂盒构建cDNA文库。并对cDNA文库的重组率和插入片段进行鉴定,从中获得contig和singlet片段及脂肪酸代谢相关基因,通过荧光定量PCR,测定delt-12脂肪酸脱氢酶基因在不同开花时期(14,16,18,20d)红花种子中的表达量。【结果】构建的红花种子cDNA文库总克隆数为7.5×106,重组率>95%,插入片段长度均>500bp,全长基因比例达到20%。从红花cDNA文库中共拼接得到contig 543条,singlet 3 444条。delt-12脂肪酸脱氢酶基因序列在成熟红花种子中的表达量较其他时期高。【结论】成功建立了红花种子cDNA文库,克隆了delt-12脂肪酸脱氢酶基因,且该基因表达量在红花种子成熟过程中逐渐升高。