八角ISSR—PCR反应体系的建立及引物筛选研究

编号 zgly0000824038

文献类型 期刊论文

文献题名 八角ISSR—PCR反应体系的建立及引物筛选研究

学科分类 220.45;经济林学

作者 吴涛  陈海云  陈少瑜  宁德鲁  冯丹  李勇杰  张艳丽 

作者单位 云南省林业科学院  云南省森林植物培育与开发利用重点实验室 

母体文献 西部林业科学 

年卷期 2013(2)

页码 8-13

年份 2013 

分类号 S759.3 

关键词 八角  ISSR—PCR  反应体系  DNA模板  扩增程序  引物筛选 

文摘内容 以文山、广西2个居群6个单株的八角嫩叶为研究材料, 以八角叶片基因组DNA为模板, 在分析归纳相关树种ISSR—PCR体系的基础上, 确定一个反应体系并对ISSR引物库进行筛选, 同时结合正交设计针对具体引物进行体系优化。结果表明, 八角的ISSR—PCR反应体系(25μL)为DNA模板0.003～0.016ng, TaqDNA聚合酶0.5—1.0U, dNTPs0.2mmol·L-1, Mg2+浓度2.5—3.0mmol·L-1, 引物浓度0.6—0.8μmol·L-1。扩增程序为, 94℃预变性5min; 94℃变性30S, 引物特异温度退火45S, 72℃延伸1min, 40个循环; 72℃最后延伸7min; 4℃保存。获得效果稳定并具有多态性的ISSR引物13条。研究结果可为八角遗传多样性分析和种质资源鉴定等研究奠定基础。