编号
zgly0001645957
文献类型
期刊论文
文献题名
白蜡虫ws基因RNAi载体构建及原核表达dsRNA
作者单位
中国林业科学研究院资源昆虫研究所国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室
母体文献
林业科学研究
年卷期
2018年04期
年份
2018
分类号
S899.1
关键词
白蜡虫
WS
L4440
原核表达
dsRNA
文摘内容
[目的]构建白蜡虫(Ericerus pela)蜡酯合酶(wax synthase,WS)基因干扰载体并建立其体外dsRNA(doublestranded RNA,dsRNA)原核表达体系,低成本大量制备白蜡虫ws基因的dsRNA。[方法]克隆白蜡虫蜡酯合酶基因ws片段,连入L4440载体,将重组质粒转入大肠杆菌HT115感受态细胞,经IPTG诱导获得与目的片段相对应的dsRNA。[结果]白蜡虫ws基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体成功构建,重组质粒转入HT115感受态细胞经IPTG诱导后菌体成功表达dsRNA,dsRNA的平均获得量1 705 ng·m L-1。[结论]该研究通过原核表达白蜡虫ws基因的dsRNA,为后续利用RNAi实验研究白蜡虫ws基因功能及作用机理奠定基础。