美国白蛾几丁质酶细菌表达的RNA干扰载体构建及其介导的RNA干扰

编号 zgly0001667236

文献类型 期刊论文

文献题名 美国白蛾几丁质酶细菌表达的RNA干扰载体构建及其介导的RNA干扰

作者 王越  张苏芳  徐瑶  方加兴  孔祥波  刘福  张真 

作者单位 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2019年02期

年份 2019 

分类号 S433.4 

关键词 美国白蛾  HT115菌株  L4440  几丁质酶  RNA干扰 

文摘内容 [目的]探索细菌表达dsRNA介导的RNAi在美国白蛾中的可行性,为RNAi技术在美国白蛾等林业害虫上的应用提供依据。[方法]选择几丁质酶HcChi基因作为靶标,设计有效的干扰片段,构建到L4440干扰载体上,并转入HT115大肠杆菌菌株。IPTG诱导HT115表达HcChi的干扰片段,用菌液持续饲喂美国白蛾幼虫,观察幼虫生长情况,定量PCR检测HcChi的转录水平。[结果]构建了带有HcChi-L4440表达载体的HT115菌株,经IPTG诱导能够合成HcChi-dsRNA,浓缩菌液持续饲喂幼虫显著抑制HcChi的表达,相对表达量显著下降了76.7%～90.3%,幼虫生长发育迟缓,体重增长量与对照相比显著减小40.7%。[结论]成功构建HcChi RNA干扰载体,通过饲喂法在美国白蛾中获得RNAi效应。该体系首次在美国白蛾中建立,为该物种的基因功能研究和生物防治提供新思路。