川西云杉几丁质酶基因PlCHI的克隆、表达与生物信息学分析

编号 zgly0001678425

文献类型 期刊论文

文献题名 川西云杉几丁质酶基因PlCHI的克隆、表达与生物信息学分析

作者 刘利娟  刘裕峰  杨帅  刘应高 

作者单位 四川农业大学林学院 

母体文献 植物科学学报 

年卷期 2019年04期

年份 2019 

分类号 Q943.2  S791.18 

关键词 川西云杉  几丁质酶  基因克隆  生物信息学  原核表达 

文摘内容 以川西云杉(Picea likiangensis var. balfouriana (Rehd. et Wils.) Hillier ex Slsvin)为材料,利用RTPCR技术,克隆获得几丁质酶基因Pl CHI的cDNA全长序列,并对该基因的序列特征及基因表达情况进行分析。结果显示,Pl CHI的开放阅读框长1017 bp,共编码338个氨基酸;蛋白序列结构域分析结果表明,Pl CHI为ClassⅠ类几丁质酶,属19家族,兼具溶菌酶活性;该序列与其他植物几丁质酶的蛋白序列相似性较高。系统发育分析结果显示,川西云杉Pl CHI序列与北美云杉(Picea sitchensis (Bong.) Corr.)、黑松(Pinus thunbergii Parl.)等松科植物亲缘关系最近。进一步将Pl CHI重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,表达出约45 k D的蛋白,主要以包涵体形式存在,且在25℃下采用0.2 mmol/L的IPTG诱导4 h时蛋白的表达量最佳。