光滑鳖甲抗菌肽的原核表达条件优化及其抗菌活性

编号 zgly0001528273

文献类型 期刊论文

文献题名 光滑鳖甲抗菌肽的原核表达条件优化及其抗菌活性

作者 海力且木·艾力  徐鑫  刘忠渊 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 Q78 

关键词 光滑鳖甲  抗菌肽  原核表达  蛋白纯化  抗菌活性 

文摘内容 【目的】本研究旨在探索光滑鳖甲Anatolica polita borealis抗菌肽Ap AMP1015的最佳原核表达条件及其抗菌活性。【方法】利用生物信息学方法对得到的Ap AMP1015基因序列和蛋白结构进行分析,运用原核表达技术表达Trx A-Ap AMP1015融合蛋白,通过Western blot方法鉴定蛋白,并利用亲和层析的方法获得纯化的Trx A-Ap AMP1015融合蛋白,抑菌圈实验验证蛋白抗菌活性。【结果】克隆得到光滑鳖甲抗菌肽基因Ap AMP1015,其开放阅读框长387 bp,编码128个氨基酸,其中包含由19个氨基酸组成的信号肽和75个氨基酸组成的成熟肽。NCBI数据库同源序列比对结果显示该蛋白属Coleoptericin抗菌肽家族。确定了蛋白表达的最佳条件:0.1 mmol/L IPTG 150 r/min 25℃诱导4 h。肠激酶切割后的Ap AMP1015能够有效抑制大肠杆菌Escherichia coli的生长。【结论】克隆得到光滑鳖甲抗菌肽基因Ap AMP1015,获得了其编码蛋白的最优表达条件,研究发现Ap AMP1015能够有效抑制大肠杆菌的生长。本研究为光滑鳖甲抗菌肽Ap AMP1015的应用和进一步研究奠定了基础。