液泡膜水通道蛋白γ-TIP表达载体的构建及其抗体的制备

编号 zgly0001210875

文献类型 期刊论文

文献题名 液泡膜水通道蛋白γ-TIP表达载体的构建及其抗体的制备

作者 朱美君  王学臣  陈珈  杜敏 

作者单位 中国农业大学生物学院!北京  100094 

母体文献 植物学报 

年卷期 1999年11期

年份 1999 

分类号 Q942.6 

关键词 水通道蛋白  水通道蛋白抗体  原核表达  pGEX－KG  pGEX－TIP  拟南芥 

文摘内容 利用PCR技术，从拟南芥（Arabidopsisthaliana（L．）Heynh．）液泡膜水通道蛋白γ－TIP的cDNA中扩增了含水通道特异保守区的205bp片段，并将其构入pGEX－KG原核表达载体。酶切、测序分析表明构建的重组质粒pGEX-TIP结构正确。0．4mmol/L的IPTG可诱导表达分子量为32kD融合蛋白GST-TIP，表达蛋白以包涵体形式存在，约占菌体总蛋白的50％。实验用SDS-PAGE制备电泳从菌体的超声裂解液中纯化了GST-TIP融合蛋白，以此融合蛋白为抗原制备了高质量的液泡膜水通道蛋白的抗体，为研究水通道蛋白在组织中的定位及生理功能提供了有用的蛋白探针。