拟南芥SAT1蛋白的原核表达及抗体制备

编号 zgly0001528910

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥SAT1蛋白的原核表达及抗体制备

作者 向小利  余桂容  宋军  蒲志刚  徐利远  杜文平  陈谦  赵成昊  潘光堂 

作者单位 四川省农业科学院  丹东农业科学院  四川农业大学玉米研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年06期

年份 2016 

分类号 Q943.2 

关键词 拟南芥  丝氨酸乙酰转移酶  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 丝氨酸乙酰转移酶(serine acetyltransferase,SAT)是甲硫氨酸和半胱氨酸合成途径的关键酶,利用该基因提高作物中甲硫氨酸水平具有广阔的应用前景。为了研究拟南芥SAT1(Arabidopsis thaliana SAT1)基因的蛋白表达情况及相关功能,构建了带有His标签的AtSAT1基因原核表达载体p ET-30b(+)-SAT1-His(6)。将其导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经固定化金属离子亲和层析(IMAC)纯化获得了抗原蛋白SAT1-His(6)。该抗原蛋白经免疫兔子,成功制备了具有较高特异性和灵敏性的SAT1蛋白多克隆抗体。Western blotting表明,该抗体可用来检测转AtSAT1基因的转基因玉米株系中SAT1蛋白的积累量,为后期对该基因开展进一步深入研究具有重要意义。