西农萨能羊MAT基因的原核表达及多克隆抗体制备

编号 zgly0000890402

文献类型 期刊论文

文献题名 西农萨能羊MAT基因的原核表达及多克隆抗体制备

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李芳  罗军  许会芬  石恒波  朱江江 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  农业生物技术实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报;自然科学版 

年卷期 2014(12)

页码 1-6+12

年份 2014 

关键词 奶山羊MAT基因  原核表达  亲和纯化  多克隆抗体 

文摘内容 【目的】制备高特异性、高效价的乙酰/丙二酸单酰转移酶(MAT)多克隆抗体,为研究山羊MAT在脂肪酸代谢中的功能奠定基础。【方法】采用PCR方法扩增奶山羊的MAT基因,将其亚克隆到pET32a(+)载体得到pET32a(+)-MAT原核表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。使用Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化融合蛋白,纯化的MAT蛋白经复性后进行活性检测。采用皮下免疫法将纯化的MAT蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,用ELISA和Western blot检测血清多克隆抗体的效价和特异性。