家蚕生殖细胞相关基因nanos的克隆表达及在胚胎发育中的表达模式

编号 zgly0000521814

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕生殖细胞相关基因nanos的克隆表达及在胚胎发育中的表达模式

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 赵国力  陈克平  姚勤  郭忠建 

作者单位 江苏大学生命科学研究院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2007,50(11)

页码 1092-1098

年份 2007 

分类号 Q966 

关键词 家蚕  nanos  胚胎发育  原始生殖细胞  荧光定量PCR  Western  blot 

文摘内容 【目的】探讨nanos基因在家蚕Bombyxmori胚胎发育中的表达模式,为进一步研究该基因在家蚕胚胎发育中的功能奠定基础。【方法】根据本实验室提交到GenBank中家蚕nanos的cDNA序列(登录号EF647589)设计引物,扩增出了一条长684bp的编码片段,对该片段进行了克隆和表达,亲和纯化表达的蛋白并免疫新西兰大白兔制备抗体。Western blot检测家蚕早期胚胎nanos的表达情况,荧光定量PCR检测nanos在整个家蚕胚胎发育中的表达情况。【结果】克隆并表达了一条长684bp的编码片段,得到了分子量约33kD的融合蛋白。用制备的抗血清对家蚕早期胚胎蛋白的Western blot检测表明,nanos在此阶段基本是恒定表达。荧光定量PCR结果显示刚产的卵中nanos的表达量最大,第2天开始急剧下降,此后到第10天表达量几乎没有变化。【结论】本实验克隆的nanos是家蚕中的一个同源物,该基因在家蚕胚胎发育中的表达模式与蜜蜂等有很大的不同,反映了昆虫生殖细胞形成机制的多样性。