编号
zgly0000474762
文献类型
期刊论文
文献题名
大肠杆菌vpr基因突变株的蛋白表达及功能研究
作者单位
上海交通大学农业与生物学院
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
母体文献
中国农业科学
年卷期
2006,39(1)
页码
176-180
年份
2006
分类号
Q78
Q943.2
关键词
噬菌体裂解
敏感性
细胞壁吸附
Western
blot
受体
文摘内容
【目的】进一步确定印, 基因及相关蛋白的功能。【方法】在获得vpr同源基因突变株MC1061△vpr的基础上, 构建了vpr基因突变株的回复株MC1061-C, 并进行了噬菌体裂解试验、细胞壁吸附试验、蛋白表达和印迹试验。【结果】亲本株MC1061和回复株MC1061-C对VT2噬菌体C43b的裂解敏感, 突变株MC1061△vpr抵抗噬菌体C43d的裂解。噬菌体吸附细胞壁试验中, 吸附30min后, 亲本株和回复株的上清液中分别存在6.4%和5.2%的游离噬菌体, 吸附到90min时未有大量的游离噬菌体释放。噬菌体与突变株的细胞壁吸附30min后, 上清液中有85.4%的游离噬菌体存在, 表明VT2噬菌体能与亲本MC1061和回复株MC1061-C的细胞壁不可逆吸附, 但不能与突变株MC1061△vpr, 的细胞壁发生不可逆吸附。在蛋白表达中, Western blot显示回复株和亲本株均能转印出特异性90000蛋白主带, 而突变株没有。【结论】vpr基因表达的分子量为90000的vpr蛋白与VT2噬菌体的裂解敏感性有关, 可能是VT2噬菌体的裂解受体。