微小隐孢子虫抗原CTL细胞表位预测及多表位基因的原核表达

编号 zgly0001383298

文献类型 期刊论文

文献题名 微小隐孢子虫抗原CTL细胞表位预测及多表位基因的原核表达

作者 李艳  陈兆国  聂奎  米荣升 

作者单位 西南大学动物科技学院  中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室  中国农业科学院动物源性食品安全研究中心 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2010年02期

年份 2010 

分类号 R392 

关键词 微小隐孢子虫  表位预测  多表位基因  原核表达  抗原性 

文摘内容 应用多个服务器对微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)候选疫苗抗原的氨基酸序列进行分析,预测可能存在的CD8+细胞毒性T细胞(CD8+cytotoxic Tlymphocyte,CD8+CTL)表位。从6种常见的免疫效果较好的候选疫苗抗原基因中选出10个分值较高的表位基因串联在一起,形成一条多表位基因,进行人工合成,表位之间用柔性氨基酸GGGGS或GPGPG链接,命名为CpCTL10。将该多表位基因重组入高效融合表达载体pET-28a(+),获得重组质粒pET-28a(+)-CpCTL10,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,CpCTL10基因在大肠杆菌中主要以包涵体形式高效表达,表达的重组蛋白占菌体蛋白总量的55.3%,纯化的重组蛋白纯度达75.1%。Western blot分析显示表达产物能与感染隐孢子虫的鼠阳性血清发生特异性反应,表明表达的重组蛋白具有较好的抗原性,为多抗原多表位疫苗的研制打下基础。