牛乳腺炎无乳链球菌Pgk基因抗原优势区原核表达产物的抗原性分析

编号 zgly0001400759

文献类型 期刊论文

文献题名 牛乳腺炎无乳链球菌Pgk基因抗原优势区原核表达产物的抗原性分析

作者 张海宝  布日额  吴金花  王学理  孙立杰  唐吉思  锡林高娃  刘燕  张忠祥 

作者单位 内蒙古民族大学生命科学学院  内蒙古民族大学动物科技学院  内蒙古通辽市家畜繁育指导站 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2011年01期

年份 2011 

分类号 S858.23 

关键词 无乳链球菌  Pgk基因  原核表达  抗原性 

文摘内容 为了探索牛乳腺炎无乳链球菌磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,Pgk)基因编码蛋白的抗原性,根据GenBank公布的牛源无乳链球菌Pgk基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR扩增出Pgk蛋白抗原优势区的编码序列,并对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及抗原性鉴定。结果显示克隆的Pgk基因序列含有984 bp,编码328个氨基酸残基。临床分离株与GenBank上公布的B群无乳链球菌菌株Pgk基因(AE009948)核苷酸序列同源性为99.09%,氨基酸序列同源性为99.69%。将扩增的Pgk基因片段克隆至原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体Pgk-pET30a(+),再将筛选的阳性重组质粒转化至BL21工程菌,经IPTG诱导获得部分可溶性表达Pgk重组蛋白。经Ni2+亲和层析柱纯化得到纯度在90%以上的蛋白,经Western blot分析结果表明,重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步探索其对奶牛的免疫原性研究奠定了良好的实验基础。