布鲁菌外膜蛋白Omp31原核表达及抗原性分析

编号 zgly0001382835

文献类型 期刊论文

文献题名 布鲁菌外膜蛋白Omp31原核表达及抗原性分析

作者 徐杰  王玉飞  汪舟佳  乔凤  钟志军  杜昕颖  赵瑾  曲勍  高岚  陈泽良 

作者单位 兰州大学生命科学学院  军事医学科学院疾病预防控制所  南京农业大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S852.614 

关键词 布鲁菌  Omp31蛋白  原核表达  抗原性 

文摘内容 克隆羊布鲁菌的外膜蛋白Omp31基因,在大肠埃希菌中表达、纯化,并对Omp31蛋白的抗原性进行分析。以羊布鲁菌的染色体DNA为模板,扩增Omp31基因,双酶切后克隆至pET32a上,在大肠埃希菌ER2566(DE3)中诱导表达,组氨酸结合树脂柱纯化,Western blot鉴定Omp31蛋白的抗原性。将Omp31克隆至载体pET32a,提取的重组质粒经PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析确定目的基因成功插入到了克隆载体中。将重组质粒转化于大肠埃希菌ER2566(DE3)中表达获得HIS融合蛋白,SDS-PAGE分析证明,表达产物为43 ku的融合蛋白。Western blot结果表明,表达的蛋白具有与布鲁菌外膜蛋白相同的抗原性。