棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

编号 zgly0001298746

文献类型 期刊论文

文献题名 棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

作者 黄小红  陈清西  尤民生  王君  关雄 

作者单位 福建农林大学动物科学学院  厦门大学生命科学学院  福建农林大学动物科学学院 生物农药与化学生物学教育部重点实验室  福州350002  教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室  福建厦门361005  生物农药与化学生物学教育部重点实验室  福州350002 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2005年04期

年份 2005 

分类号 S435.622.2 

关键词 棉铃虫  N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶  分离纯化  动力学  稳定性 

文摘内容 以棉铃虫Helicoverpaarmigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂。纯酶的比活力为2678.79U/mg。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃。该酶在pH4~8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16mmol/L,最大反应速度Vm为10.73μmol.L-1.min-1。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24kJ/mol。