编号
zgly0000807447
文献类型
期刊论文
文献题名
兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达
学科分类
220.1520;林木遗传学
作者单位
西北农林科技大学动物科技学院
中国农业科学院上海兽医研究所
浙江省农业科学院
母体文献
西北农林科技大学学报: 自然科学版
年卷期
2012(4)
页码
21-24
年份
2012
分类号
S852.659.6 Q785
关键词
兔病毒性出血症病毒
岩藻糖基转移酶
原核表达
文摘内容
【目的】:克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】:从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】:成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】:成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。