新疆黄精凝集素基因的克隆、序列分析和表达

编号 zgly0000560155

文献类型 期刊论文

文献题名 新疆黄精凝集素基因的克隆、序列分析和表达

作者 孙素荣  张智  李素丽  胡俊  张富春 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院 

母体文献 生物工程学报 

年卷期 2008,24(3)

页码 387-394

年份 2008 

分类号 Q949.718.2  S763.721.1 

关键词 新疆黄精  凝集素  序列比较  原核表达 

文摘内容 用百合科黄精属植物凝集素基因的保守序列为引物，从新疆黄精的叶中克隆出黄精凝集素的全长cDNA。序列分析表明，克隆获得的新疆黄精凝集素(Polygonatum roseum agglutinin，PRA)基因完整的ORF片段大小为550bp，编码1条长159个氨基酸肽链，没有内含子，其中N端的28个氨基酸是信号肽。对新疆黄精凝集素cDNA序列同源性的分析比较发现，黄精属植物凝集素基因之间有很高的同源性(92％)。氨基酸序列比对和SWISS-MODEL同源模建分析表明，PRA由12个β-折叠片组成的β-桶结构，具有与单子叶植物甘露糖结合凝集素相似的空间结构。重组质粒pGEX-4T-1-PRA和pMAL-p2x-PRA，分别转化E．coli BL21进行原核表达，新疆黄精凝集素能够以可溶性融合蛋白形式表达，分子量约为14kD。构建真核表达载体pcDNA3-PRA，免疫小鼠后获得了抗血清。免疫印迹结果显示为单一的条带，证明该抗血清具有针对PRA抗原的专一性。新疆黄精凝集素基因的克隆、原核和真核的表达以及抗血清的制备，为进一步研究凝集素蛋白的性质和功能，并为植物抗病虫基因工程研究提供有用的实验材料。