大菱鲆表皮蛋白质组双向电泳技术的建立及优化

编号 zgly0000706278

文献类型 期刊论文

文献题名 大菱鲆表皮蛋白质组双向电泳技术的建立及优化

作者 薛宝贵  黄智慧  周洲  马爱军 

作者单位 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所  上海海洋大学水产与生命学院 

母体文献 渔业科学进展 

年卷期 2011,32(2)

页码 41-46

年份 2011 

分类号 Q953 S965.399 

关键词 大菱鲆  表皮组织  蛋白质  双向电泳 

文摘内容 通过对表皮蛋白质提取方法、不同裂解液配方、等点聚焦程序和上样量等条件的对比试验,建立及优化了大菱鲆表皮组织蛋白质的双向电泳体系。试验采用改良的TCA/丙酮和超声波提取相结合的方法提取大菱鲆表皮组织的全蛋白,裂解液配方根据Bio-Rad公司推荐的进行调整,使用17cmpH4~7的IPG胶条被动水化上样,上样量为250μg。等点聚焦程序采用30V线性6h、250V线性2.5h、500V线性1.5h、1000V快速2h、4000V线性3h、8000V快速3h、8000V线性1h、500V24h,凝胶银染后用I mage Master2D Platinum7.0软件进行分析,最终得到较满意的双向电泳图谱,具有较高的分辨率和重复性,为大菱鲆蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。