家蝇溶菌酶MDLZM2基因的克隆、序列分析及原核表达

编号 zgly0001524558

文献类型 期刊论文

文献题名 家蝇溶菌酶MDLZM2基因的克隆、序列分析及原核表达

作者 魏川川  彭传林  胡亚  修江帆  王宇  尚小丽  吴建伟 

作者单位 贵州省疾病预防控制中心  贵州医科大学基础医学院 

母体文献 环境昆虫学报 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 Q78  Q966 

关键词 家蝇  Lysozyme  克隆  原核表达  生物信息学 

文摘内容 对家蝇溶菌酶(Musca domestica lysozyme,MDLZM2)基因进行克隆、序列分析,构建原核表达载体并在大肠杆菌中表达。从Gen Bank家蝇基因组中筛选获得MDLZM2基因。以该基因的序列设计引物,进行PCR扩增,测序分析获得该基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、二级结构、三级结构和保守结构域等方面进行预测和分析。构建p EASY-E1-MDLZM2重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S Chemically Competent Cell中进行诱导表达及纯化。结果表明MDLZM2基因ORF全长552 bp,编码183个氨基酸,理论分子量21.2 k Da;等电点为6.13,具有Lysozyme家族的蛋白保守结构域。成功构建重组原核表达p EASY-E1-MDLZM2并诱导表达、纯化重组蛋白,为进一步研究该蛋白的生物学及免疫学活性奠定了基础。