斜纹夜蛾inx1,inx4基因的克隆及表达载体构建

编号 zgly0001495676

文献类型 期刊论文

文献题名 斜纹夜蛾inx1,inx4基因的克隆及表达载体构建

作者 刘信毅  罗开珺 

作者单位 云南大学生命科学学院云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室 

母体文献 环境昆虫学报 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 S433.4 

关键词 斜纹夜蛾  innexin  hemichannel  原核表达  真核表达 

文摘内容 无脊椎动物innexin(inx)基因是生物进化上高度保守的基因,区别于脊椎动物的connexin。Inx基因可在细胞膜表面形成功能性的半通道蛋白hemichannel和间隙连接蛋白gap junction,这两种蛋白都与信号传导,胚胎发育,神经系统分化等功能相关。本研究在斜纹夜蛾Spodoptera litura血细胞转录组数据中发现特异的inx1,inx4序列,通过RT-PCR克隆出了Spli-inx1,Spli-inx4,经过比对,确定它们都属于保守的inx基因家族,具有四个保守的跨膜结构域,两个胞外环,一个胞内环,一个位于第二个跨膜结构域前端的YYQWV基序及在胞外环上各有2个半胱氨酸残基。其中,Spli-inx1开放阅读框全长1086 bp,编码361个氨基酸;Spli-inx4开放阅读框全长1116 bp,编码371个氨基酸。构建了包含ORF全长编码区的原核表达载体及真核表达载体,经Western blot证明Spli-inx1和Spli-inx4均可在大肠杆菌及鳞翅目昆虫High Five,Sf9和Spli221细胞系中的表达,初步探索了它们在细胞中的结构和功能。为深入研究Spli Inx1和Spli Inx4的功能奠定基础。