蜘蛛拖牵丝蛋白基因的克隆与表达

编号 zgly0000705660

文献类型 期刊论文

文献题名 蜘蛛拖牵丝蛋白基因的克隆与表达

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 刘丹梅  王芬  李文利 

作者单位 大连理工大学环境与生命学院  辽东学院农学院 

母体文献 基因组学与应用生物学 

年卷期 2011,30(1)

页码 16-20

年份 2011 

分类号 Q959.226 

关键词 拖牵丝蛋白基因  基因克隆  原核表达  真核表达 

文摘内容 蜘蛛丝具有极高的强度和韧度,工业和医学应用价值很高,但由于蜘蛛的不可驯养性使其应用受到限制。因此,本文尝试利用基因工程的方法获得蛛丝蛋白的表达。我们利用巢式PCR技术从大腹圆蛛Araneus ventricosus基因组中克隆了长度为837bp的拖牵丝蛋白基因(ASP),并分别将其构建至原核表达载体pGEX-6p-1和真核表达载体pGFP-N2上,分别命名为pASG和pASN。pASG在大肠杆菌中16℃下24h诱导表达后,经蛋白质印迹证明成功地表达了GST-ASP融合蛋白;pASN转染昆虫sf9细胞48h后观察到了绿色荧光蛋白GFP的表达,表明ASP基因在大肠杆菌和真核细胞中分别得到了正确表达。本研究为利用基因工程的方法开发蛛丝蛋白的生产途径提供了有益的尝试。