猪圆环病毒2型ORF5编码非结构蛋白的表达

编号 zgly0001373617

文献类型 期刊论文

文献题名 猪圆环病毒2型ORF5编码非结构蛋白的表达

作者 李增魁  李英 

作者单位 青海大学农牧学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2009年05期

年份 2009 

分类号 S852.659.2 

关键词 猪圆环病毒2型  ORF5基因  原核表达  真核表达  纯化 

文摘内容 【目的】探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)中ORF5所编码非结构蛋白(NS)的功能。【方法】根据Gen-Bank已发表PCV-2基因组序列设计特异引物,分别以HZ0201株(AY188355)、美国98-15237株病毒DNA为模板,采用PCR法扩增PCV-2ORF5基因,并构建了pGEX-4T-1-ORF5原核表达载体和pEGFP-C2-ORF5真核表达载体,对ORF5重组蛋白进行SDS-PAGE电泳、Western blot分析,用真核表达载体pEGFP-C2-ORF5转染PCV-2易感细胞PK-15。【结果】PCV-2ORF5基因长162bp,编码54个氨基酸;其所编码蛋白在E.coli中以包涵体形式存在,分子质量大小约为32ku。【结论】PCV-2ORF5编码重组蛋白在真核PK-15细胞中成功表达。