牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

编号 zgly0001469504

文献类型 期刊论文

文献题名 牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者 季新成  段琛  王克栋  史茜  于学辉  冉多良 

作者单位 新疆出入境检验检疫局  国际关系学院  新疆农业大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年01期

年份 2014 

分类号 S852.65 

关键词 牛病毒性腹泻病毒  内标  双重反转录-聚合酶链反应  共扩增 

文摘内容 为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36%。该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制。