猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

编号 zgly0001715405

文献类型 期刊论文

文献题名 猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

作者 张宏伟  王建华  陈本龙  麻丽丹  宋喆  蒲静 

作者单位 西华师范大学生命科学学院  天津海关  丹东海关  北京海关 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年09期

年份 2020 

分类号 S852.65 

关键词 猪瘟病毒  牛病毒性腹泻病毒  双重荧光RT-PCR  检测方法 

文摘内容 为同时检测猪源临床样本中的猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV),基于这两种病毒的5’UTR序列设计特异引物和TaqMan探针,建立了一种检测CSFV和BVDV的双重荧光RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、最低检出限和重复性等进行了评价。结果显示,该方法只对CSFV和BVDV呈现特异性扩增,对猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型不发生交叉反应,对阳性标准对照CSFV-5’UTR-RNA、BVDV-1-5’UTR-RNA和BVDV-2-5’UTR-RNA,最低可分别检出27、36和32拷贝/μL。该方法的组内和组间试验Ct值变异系数介于0.11%～1.20%,具有良好的重现性。对152份猪组织样本用该方法进行CSFV和BVDV核酸检测,结果检出CSFV阳性样本16份,BVDV阳性样本3份,CSFV和BVDV双阳性样本1份,与国标和OIE《陆生动物诊断试验和疫苗》相应的荧光RT-PCR方法阳性符合率为100%。结果表明,本研究建立的双重荧光RT-PCR方法可用于临床样本中的CSFV和BVDV检测,从而为猪瘟防制和净化提供了一种有效的技术手段。