猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用

编号 zgly0001330647

文献类型 期刊论文

文献题名 猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用

作者 朱小甫  张志  李晓成  陈德坤  吴旭锦 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  中国动物卫生与流行病学中心  西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100  山东青岛266032  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年06期

年份 2007 

分类号 S854.43 

关键词 猪瘟病毒  RT-nestedPCR  检测方法 

文摘内容 为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。