利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓斑驳病毒

编号 zgly0001297506

文献类型 期刊论文

文献题名 利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓斑驳病毒

作者 杨洪一  张志宏*  杜国栋  代红艳  高秀岩 

作者单位 沈阳农业大学园艺学院  沈阳农业大学园艺学院 沈阳110161  沈阳110161  沈阳110161 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2005年02期

年份 2005 

分类号 S436.68 

关键词 草莓斑驳病毒  RT-PCR  内标  检测 

文摘内容 利用改进的CTAB法提取出优质的草莓总RNA,可以稳定地进行RT PCR。针对草莓斑驳病毒(SMoV)基因组序列设计筛选引物,对病毒基因组的不同区域进行扩增,扩增产物经克隆、测序证明为SMoV的特异片段,与国外序列的同源性为91% ~97%。为了监测RNA的质量和RT PCR反应的正常进行,在检测体系中引入线粒体NADH脱氢酶基因ND2亚基作为内标,内标引物跨越内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增,可以较好地监测整个检测过程。在国内首次建立了SMoV的RT PCR检测体系,以优质的草莓总RNA为模板,结合扩增内标的检测体系,对草莓病毒指示植物和草莓栽培品种都可以进行快速稳定的检测。