正交试验优化八角ISSR-PCR反应体系

编号 zgly0000883748

文献类型 期刊论文

文献题名 正交试验优化八角ISSR-PCR反应体系

学科分类 220.45;经济林学

作者 冯丹  宁德鲁  陈少瑜  李勇杰  张艳丽  吴涛  陈海云 

作者单位 云南省林业科学院  云南省森林植物培育与开发利用重点试验室 国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点试验室 

母体文献 生物技术通报 

年卷期 2014(8)

页码 65-69

年份 2014 

关键词 八角  ISSR-PCR反应  正交设计  体系优化 

文摘内容 利用正交试验设计研究Taq DNA聚合酶、DNA模板、引物(UBC 886)、dNTP、Mg2+浓度5个因素对云南八角ISSR-PCR反应的影响,建立其最佳反应体系。结果表明:25μL的反应体系中5个因子的最佳水平为:Mg2+3 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5 U、DNA模板0.016 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L。PCR最佳反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸1 min,40次循环;72℃最后延伸7 min,4℃保存。