本氏针茅SRAP-PCR反应体系的建立及引物筛选

编号 zgly0001618995

文献类型 期刊论文

文献题名 本氏针茅SRAP-PCR反应体系的建立及引物筛选

作者 井赵斌  俞靓  魏琳  程积民 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  西北农林科技大学资源与环境学院  中国科学院水利部水土保持研究所 

母体文献 草业科学 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S543.9 

关键词 本氏针茅  SRAP  体系优化  引物筛选 

文摘内容 以本氏针茅(Stipa bungeana)幼嫩叶片为材料,建立适合本氏针茅基因组DNA提取的改良CTAB法,在此基础上采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法,对本氏针茅SRAP-PCR反应体系中的5个主要因素(DNA、Taq酶、dNTPs、Mg2+和引物)进行优化,旨在建立适合本氏针茅SRAP分析的反应体系。结果表明,在20μL总的反应体系中各组分的加入量分别为:DNA(20ng.μL-1)3μL、Taq DNA酶(5U.μL-1)0.2μL、dNTPs(2.5mmol.L-1)1.4μL、引物(10μmol.L-1)1.0μL、Mg2+(25mmol.L-1)2.0μL、10×Buffer 2.5μL、ddH2O8.9μL。体系验证和引物筛选试验表明,该体系适于本氏针茅遗传多样性分析,该体系的建立可为本氏针茅种质资源遗传多样性研究和黄土高原植被恢复及生态建设提供理论基础。