本氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

编号 zgly0001422869

文献类型 期刊论文

文献题名 本氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

作者 俞靓  井赵斌  魏琳  程积民 

作者单位 西北农林科技大学资源与环境学院  西北农林科技大学动物科技学院  中国科学院水利部水土保持研究所 

母体文献 中国草地学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S543.9 

关键词 本氏针茅  ISSR  体系优化 

文摘内容 以CTAB法提取的本氏针茅(Stipa bungeana Trin.)基因组DNA为模板,采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法,对影响本氏针茅ISSR-PCR反应体系中的DNA、Taq酶、dNTPs、引物和Mg2+进行优化,旨在建立适合本氏针茅ISSR-PCR分析的最佳反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中各组分的浓度分别为:DNA(20ng/μL)2.5μL、Taq DNA酶(5U/μL)0.1μL、dNTPs(2.5mmol/L)1.6μL、引物(10μmol/L)2.3μL、Mg2+(25mmol/L)1.4μL、10×Buffer 2.5μL、ddH2O 9.6μL。经过体系验证和引物筛选试验表明该体系适于本氏针茅遗传多样性分析,该体系的建立为本氏针茅种质资源遗传多样性研究提供了理论基础。