葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选

编号 zgly0000654032

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭大龙  张君玉  李猛  张国海  刘崇怀 

作者单位 河南科技大学林学院  中国农业科学院郑州果树研究所 

母体文献 基因组学与应用生物学 

年卷期 2010,29(2)

页码 379-384

年份 2010 

分类号 S823 

关键词 葡萄  SRAP  体系优化  引物筛选 

文摘内容 本试验利用L16(4^5)正交试验设计探寻葡萄SRAP—PCR反应体系中的关键因子, 同时结合单因素试验简单、快捷的特点逐个对PCR反应体系的主要成分进行优化。充分利用两种方法的优点并降低试验工作量取得了较好的效果, 建立了适于葡萄的SRAP反应体系。结果表明Mg^2+浓度为影响葡萄SRAP—PCR反应的关键因素; 优化的20μLSRAP—PCR反应体系中各组分的最适含量为: 10×Buffer2.0μL, Mg^2+2.5mmol/L, dNTPs0.3mmol/L, 引物0.4μmol/L, 砌DNA聚合酶1.0U, 模板DNA1.0ng/μL。利用SRAP反应体系, 从100对SRAP引物组合中筛选出扩增稳定, 条带清晰, 多态性好的引物19对。本研究建立的适于葡萄SRAP—PCR扩增的反应体系, 将为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建, 分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础。