蓝莓SRAP—PCR反应体系的建立优化及引物筛选

编号 zgly0000811008

文献类型 期刊论文

文献题名 蓝莓SRAP—PCR反应体系的建立优化及引物筛选

作者 尹德洁  苏淑钗  刘肖  侯智霞  陈露 

作者单位 省部共建森林培育与保护重点实验室(北京林业大学) 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2013(2)

页码 35-39

年份 2013 

分类号 S663.9 

关键词 蓝莓  分子标记  SRAP—PCR  体系优化  引物筛选 

文摘内容 为进一步利用分子标记技术进行蓝莓品种鉴定及种质资源遗传多样性的分析, 拟建立蓝莓新型SRAP标记(相关序列扩增多态性)的优化PCR体系并进行引物组合的筛选。运用改良CTAB法所提取的蓝莓幼嫩叶片的DNA, 采用单因子试验, 分析了模板DNA浓度、引物浓度、退火温度等影响SRAP—PCR的主要参数, 建立了适合蓝莓SRAP—PCR的优化体系, 20μL的PCR反应体系: 模板DNA浓度120ng、引物浓度0.40μmol/L、2xTaq PCR Master Mix 10μL, 剩余体积用去离子水补足; 最佳PCR扩增程序的退火温度为50℃。并从80对SRAP引物组合中筛选出条带清晰且多态性丰富的15对引物组合。