烟草合子时期表达基因NtZE1的克隆及结构分析

编号 zgly0001674307

文献类型 期刊论文

文献题名 烟草合子时期表达基因NtZE1的克隆及结构分析

作者 罗岸  左紫怡  焦雄  刘夏 

作者单位 长江大学生命科学学院 

母体文献 亚热带植物科学 

年卷期 2019年02期

年份 2019 

分类号 Q943.2 

关键词 烟草  合子  基因克隆  生物信息学分析  基因表达活性检测 

文摘内容 通过分析烟草Nicotianatabacum长形合子和卵细胞的c DNA差减文库,获得一条合子时期表达的基因NtZE1的EST序列。分析显示,EST序列中含有315 bp编码序列,通过RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction)成功克隆到该序列。生物信息学分析显示,NtZE1基因编码105个氨基酸残基;Nt ZE1蛋白为不稳定的亲水性蛋白,具有信号肽;蛋白二级结构多为α-螺旋,软件预测该蛋白可能定位于细胞外。利用Genome walking技术获得ATG起始密码子前共2578bp的5’侧翼序列(启动子和5’UTR),将该序列连入EGFP核定位载体中并通过瞬时表达技术使其在小叶烟草N. benthamiana叶表皮细胞中表达,有明显的绿色荧光,证实所获得的5’侧翼序列具有启动基因表达的活性。