羽衣甘蓝ARC1的抗体制备及蛋白表达分析

编号 zgly0001540197

文献类型 期刊论文

文献题名 羽衣甘蓝ARC1的抗体制备及蛋白表达分析

作者 李晓屿  王秋红  李玉花  蓝兴国 

作者单位 东北林业大学生命科学学院  黑龙江大学农作物研究院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2017年02期

年份 2017 

分类号 S681.9 

关键词 羽衣甘蓝  自交不亲和  ARC1  抗体制备  蛋白表达 

文摘内容 ARC1是芸薹属植物自交不亲和（Self-incompatibility,SI）信号复合体下游传递因子,特异性地介导SI信号传递。利用原核表达系统对羽衣甘蓝（Brassica oleracea var.acephala）ARC1的全长蛋白（1663 aa,BoARC1-F）、UND结构域蛋白（1279 aa,BoARC1-N）和ARM结构域蛋白（361663aa,BoARC1-C）进行重组表达。SDS-PAGE结果显示这3种蛋白分别在分子量68、33和38 kD处特异性地诱导表达。利用Ni2+-NTA树脂亲和层析技术获得重组蛋白。将BoARC1-C蛋白免疫小鼠并通过细胞融合技术制备单克隆抗体,获得2株单克隆抗体。交叉反应试验结果显示制备的单克隆抗体具有ARC1识别特异性。通过免疫印迹技术检测BoARC1在不同组织和不同发育阶段柱头中的表达,结果显示BoARC1特异性地在羽衣甘蓝柱头中表达,而且在开花阶段的柱头表达量最高。