葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库的构建

编号 zgly0001381675

文献类型 期刊论文

文献题名 葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库的构建

作者 黎万顺  冯国忠  陈斌  何正波 

作者单位 昆虫与分子生物学研究所重庆高校生物活性物质工程研究中心重庆高校动物生物学重点实验室 

母体文献 昆虫知识 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S433  Q96 

关键词 葱蝇  冬滞育蛹  全长cDNA文库  SMART技术 

文摘内容 葱蝇Delia antiqua(Meigen)具有冬滞育的特性且与黑腹果蝇Drosophila melanogaster近缘。该研究目的在于构建葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库,为进一步的冬滞育专化基因筛选、克隆、和表达分析奠定基础。利用RNAiso试剂盒提取葱蝇冬滞育蛹的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,经SfiⅠ酶切消化后,将cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB。经鉴定,原始文库的滴度为2.4×107cfu/mL。随机挑取15个克隆,经PCR快速鉴定,插入片段大小在0.5～3kb之间,平均大小在1kb左右,重组率达100%。结果表明该研究获得高质量的葱蝇冬滞育蛹cDNA文库。