利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库

编号 zgly0001335220

文献类型 期刊论文

文献题名 利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库

作者 徐刚标  房学爽  叶翠层 

作者单位 中南林业科技大学 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2008年06期

年份 2008 

分类号 S792.99 

关键词 生物技术  珙桐  叶  全长cDNA文库  SMART技术 

文摘内容 以珙桐叶片为研究材料,用Rneasy Plant Mini Kit提取珙桐叶片组织总RNA,反转录成单链cDNA,长距离PCR方法合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化、SfiI酶切后,采用CHROMA SPIN-400柱分级分离,回收0.5 kb以上的cDNA组分,以λTriplEx2载体连接并进行体外包装,构建了珙桐叶全长cDNA文库.结果表明:以XL1-Blue、BM25.8为受体菌测定的原始文库滴度为8.3×106pfu/mL,扩增后文库总滴度为4.16×108pfu/mL,重组率为97.3%;对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5~2.0 kb之间,文库质量较高.这为进一步开展珙桐EST测序分析、目的基因克隆及功能基因组学研究奠定了基础.