日本结缕草衰老叶片全长cDNA文库构建及酵母单杂交筛选验证

编号 zgly0001690598

文献类型 期刊论文

文献题名 日本结缕草衰老叶片全长cDNA文库构建及酵母单杂交筛选验证

作者 滕珂  檀鹏辉  范希峰  岳跃森  姜红岩  武菊英 

作者单位 北京市农林科学院北京草业与环境研究发展中心  北京林业大学草业与草原学院 

母体文献 草地学报 

年卷期 2019年06期

年份 2019 

分类号 S688.4 

关键词 日本结缕草  全长cDNA文库  酵母单杂交  脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶基因 

文摘内容 脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶（Pheophytin pheophorbide hydrolase,PPH）是叶绿素降解过程中的一个关键酶,目前有关日本结缕草（Zoysia japonica）PPH基因的上游调控机制仍不是十分清楚,筛选日本结缕草ZjPPH1基因上游转录因子可以为延长绿期延缓衰老提供理论依据。本研究利用Clontech的SMRT cDNA合成技术构建一个日本结缕草衰老叶片的高质量全长cDNA文库,其滴度为2.0×106 cfu·mL-1,插入片段平均长度大于1 kb,cDNA片段插入重组率为100%。该文库的完整性较高,可涵盖绝大多数基因信息,为酵母单杂交筛选奠定了基础。利用酵母单杂交技术,筛选到可与ZjPPH1基因启动子片段结合的候选菌落42个,并对20个候选基因进行测序和生物信息学分析,初步筛选到6个参与细胞生长和衰老过程的重要候选基因,为进一步探索ZjPPH1基因在日本结缕草衰老和叶绿素降解中的上游调控机制提供了理论支撑。