PCR结合斑点杂交技术检测鹦鹉喙羽病病毒方法的建立及应用

编号 zgly0001652384

文献类型 期刊论文

文献题名 PCR结合斑点杂交技术检测鹦鹉喙羽病病毒方法的建立及应用

作者 于晓慧  田似报  王琳  崔治中  常爽  赵鹏  李阳 

作者单位 中国动物卫生与流行病学中心  北京中科基因技术有限公司  山东农业大学动物医学院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2018年11期

年份 2018 

分类号 S852.65 

关键词 鹦鹉喙羽病  核酸斑点杂交  全基因组  遗传进化 

文摘内容 鹦鹉喙羽病(PBFD)是鹦鹉目前最常见的疾病,对鹦鹉养殖业危害极其严重。根据鹦鹉喙羽病毒(PBFDV)基因片段的克隆和序列分析,设计合成1对特异性引物,以CP基因为模板,经PCR扩增获得830 bp的核苷酸DNA,并用DIG标记DNA,制备用于检测PBFDV的特异性核酸探针。用该核酸探针对疑似感染PBFDV的鹦鹉病料进行斑点杂交检测,并对鉴定为阳性的PBFDV进行全基因组扩增和测序分析。结果显示,利用PCR结合斑点杂交技术检测PBFDV,特异性强、敏感度高,具有可重复性。鉴定为阳性的2株PBFDV全基因组序列之间同源性为100%,与已报道序列的同源性为81.5%～98.9%。本研究为我国开展PBFDV感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感、特异的检测方法。