黄芪UGPase cDNA克隆、分析及其在大肠杆菌中的表达(英文)

编号 zgly0001257373

文献类型 期刊论文

文献题名 黄芪UGPase cDNA克隆、分析及其在大肠杆菌中的表达(英文)

作者 吴晓俊  杜旻  翁颖琦  刘涤  胡之璧 

作者单位 上海中医药研究院中药研究所  上海中医药研究院中药研究所 上海200032  上海200032  上海200032 

母体文献 Acta Botanica Sinica 

年卷期 2002年06期

年份 2002 

分类号 Q943.2 

关键词 原核表达  cDNA克隆  UGPase  毛状根  膜荚黄芪 

文摘内容 在已报道的UGPase的植物cDNA序列基础上 ,从膜荚黄芪 (Astragalusmembranaceus (Fisch .)Bunge)毛状根中分离了此酶的cDNA。此cDNA全长为 1 831bp ,推测编码分子量为 5 1 .5kD、等电点为 6 .0 1的由 4 71个氨基酸残基组成的多肽。将此cDNA的开放阅读框载入质粒pET2 8(a) +并转入大肠杆菌 (Escherichiacoli)BL2 1。SDS_PAGE表明此酶已经在E .coli中获得大量表达 ,表达量约为总细菌蛋白的 4 0 %。酶活分析表明 ,转化菌中UGPase的活性比非转化菌高 0 .5 0～ 3.2 7倍 ,证明此cDNA可以在原核生物中获得表达。Northernblot表明UGPase在黄芪的根、茎、叶及毛状根中均有表达 ,在根及毛状根中表达量较高 ,证明了此酶主要分布于植物贮藏组织的报道