家蚕防御素基因的序列特征与表达模式分析及原核表达试验

编号 zgly0001433621

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕防御素基因的序列特征与表达模式分析及原核表达试验

作者 马振刚  贾俊杰  陈全梅  黄为  李田  潘国庆  周泽扬 

作者单位 西南大学农业部蚕桑学重点开放实验室  重庆师范大学生命科学学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  防御素  BmdefA基因  BmdefB基因  序列特征  表达模式  原核表达 

文摘内容 家蚕防御素(defensin)是家蚕抗菌肽家族的主要成员之一,为家蚕先天性免疫的重要效应因子。采用生物信息学方法分析家蚕防御素基因BmdefA、BmdefB的序列中各有2个外显子,2个基因分别定位于家蚕第4号和第13号染色体上;等电点预测BmdefA带有负电荷,属于罕见的阴离子型抗菌肽,而BmdefB带有正电荷,属于常见的阳离子型抗菌肽;预测2个基因编码的成熟肽分子质量均在4 kD左右。用RT-PCR方法检测BmdefA在家蚕整个发育过程中有表达,且在检测的幼虫和成虫各组织中均有表达;BmdefB从幼虫5龄第3天到成虫期表达,雄性表达量高于雌性,且在5龄第3天幼虫的生殖腺、脂肪体和血细胞中高水平表达。家蚕防御素BmdefA、BmdefB具有不同的分子特性和表达特征,暗示它们在家蚕先天免疫过程中可能行使不同的功能,甚至可能具有不同的抗菌机理。构建融合GST标签的家蚕防御素基因原核表达载体,通过在大肠杆菌细胞内诱导表达,获得可溶性的目的蛋白,使用GST亲和层析柱初步纯化表达的融合蛋白并进行Western blotting鉴定,为进一步研究BmdefA、BmdefB的体外活性和抑菌机制奠定基础。