家蚕30K蛋白新成员Slp的基因克隆及表达特征与亚细胞定位

编号 zgly0001459802

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕30K蛋白新成员Slp的基因克隆及表达特征与亚细胞定位

作者 李擎  于威  姚玉华  全滟平  聂作明  张耀洲 

作者单位 浙江理工大学生物化学研究所  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2013年02期

年份 2013 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  30K蛋白  基因克隆  序列特征  原核表达  组织分布  亚细胞定位 

文摘内容 家蚕30K蛋白是家蚕生长发育的主要能源物质,具有多种生物学功能。根据已知的30K蛋白的氨基酸序列,利用NCBI在线BLAST程序在家蚕蛋白质数据库中进行氨基酸序列相似性比对分析,发现一条新的氨基酸序列,命名为Slp蛋白（GenBank登录号:NM001126256）。该蛋白质与已知的5种家蚕30K蛋白的氨基酸序列相似度达41%以上,且具有共同的保守结构域Lipoprotein11,三级结构也极其相似,推测Slp蛋白可能是家蚕30K蛋白家族新成员。利用NCBI在线工具查找获得了编码Slp的基因序列,然后利用RT-PCR技术从家蚕5龄幼虫脂肪体中克隆得到Slp的cDNA序列,并在大肠杆菌中诱导表达。利用获得的纯化Slp蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,对该蛋白质进行亚细胞定位的结果显示其主要存在于BmN细胞的细胞膜上和细胞质中。Western blotting检测Slp蛋白在家蚕不同发育时期均有表达,以5龄幼虫期的表达量最高,蛹期次之,蛾期和卵期最低;在5龄幼虫不同组织均有表达,以血淋巴和脂肪体中的表达量最高,在其它组织中的表达量较低。依据Slp蛋白的序列结构与表达特征,推测其与已知的家蚕30K蛋白具有相似的多种生物学功能。