家蚕N-乙酰基转移酶基因BmNAT的克隆与表达分析

编号 zgly0001528373

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕N-乙酰基转移酶基因BmNAT的克隆与表达分析

作者 程旭升  李斌  聂作明  盛清 

作者单位 浙江理工大学生命科学学院  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S881.2  Q78 

关键词 家蚕  N-乙酰基转移酶  基因克隆  原核表达  时空表达谱  亚细胞定位 

文摘内容 N-乙酰基转移酶（N-acetyltransferase,NAT）是昆虫体内一种催化乙酰基团在乙酰辅酶A和胺之间转移的酶,主要与色素沉积、生理节律等有关。对已公布的家蚕（Bombyx mori）N-乙酰基转移酶基因Bm NAT（Gen Bank登录号:NP001040401.1）进行生物信息学分析:该基因序列全长763 bp,ORF为564 bp,编码187个氨基酸残基,分子质量21.4 k D;多序列比对表明Bm NAT与脐橙螟（Amyelois transitella）同源蛋白质的序列相似性最高。通过原核表达的方法制备了融合Bm NAT蛋白,经蛋白质纯化并免疫新西兰兔获得多克隆抗体。亚细胞定位显示Bm NAT主要存在于细胞质和细胞核中。利用Western blotting检测Bm NAT在家蚕不同发育时期和5龄幼虫各组织器官的表达谱,结果表明Bm NAT在蛾、卵期以及5龄幼虫的头部表达量较高,与Bm NAT的qRT-PCR检测结果基本一致,初步推断Bm NAT可能在家蚕的这些组织或发育时期发挥一定的生物学功能。流式细胞实验显示Bm NAT对细胞周期可能存在一定的影响。