猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用

编号 zgly0001392949

文献类型 期刊论文

文献题名 猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用

作者 车勇良  周伦江  王隆柏  魏宏  陈少莺  陈如敬  庄向生 

作者单位 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年03期

年份 2010 

分类号 S852.65 

关键词 猪圆环病毒Ⅱ型  单克隆抗体  Cap蛋白  ELISA方法  间接免疫荧光 

文摘内容 【目的】制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体,并对其进行鉴定和应用。【方法】以超离纯化的猪圆环病毒Ⅱ型作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经间接ELISA筛选获得了2株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为8-60和10-48,对其生物学特性进行鉴定,并将其作为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。【结果】8-60和10-48的染色体数平均为98～105对,间接ELISA检测其细胞培养上清液效价分别为1∶16和1∶32,小鼠腹水效价分别为1∶3×212和1∶3×213,抗体的免疫球蛋白亚型均为IgM。间接免疫荧光结果显示,8-60和10-48能与PCV2发生反应;利用这种特性,建立了能诊断PCV2病原的间接免疫荧光诊断方法,实际应用结果表明,其诊断结果与PCR方法诊断结果基本一致,阳性和阴性的符合率分别为93.75%和100%。【结论】以制备的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。