抗番鸭呼肠孤病毒(MDRV)单克隆抗体的制备及应用

编号 zgly0001435977

文献类型 期刊论文

文献题名 抗番鸭呼肠孤病毒(MDRV)单克隆抗体的制备及应用

作者 朱小丽  陈少莺  蔡羲  程晓霞  林锋强  陈仕龙  王劭  李兆龙 

作者单位 福建省农业科学院畜牧兽医研究所  福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2012年06期

年份 2012 

分类号 S858.32 

关键词 番鸭呼肠孤病毒  单克隆抗体  间接免疫荧光 

文摘内容 【目的】制备抗番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的单克隆抗体,建立番鸭呼肠孤病毒病的间接免疫荧光(IFA)快速诊断方法。【方法】制备MDRV抗原,用之免疫Babl/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,采用IFA和ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备单克隆抗体,检测其生物学特性,应用制备的单克隆抗体建立MDRV IFA快速诊断方法。【结果】筛选到237-11,45-12和3-H3 3株特异性好并能稳定分泌抗MDRV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中45-12株单抗为IgM亚型,237-11和3-H3株单抗为IgG3亚型。45-12和3-H3 2株单抗具有ELISA特性,效价分别为104和105;237-11株单抗具有IFA特性,效价达103。特异性测定结果显示,3株单抗仅与MDRV反应,而与正常细胞培养物(MDEF)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、鸭副黏病毒(PMV)和鸭肝炎病毒(DHV)均无交叉反应。应用抗MDRV单抗建立的IFA方法与病毒分离法(VI)的符合率为91%。【结论】筛选到2株具有ELISA特性、1株具有IFA特性且能分泌抗MDRV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了MDRV IFA快速诊断方法,为番鸭呼肠孤病毒病的快速诊断奠定了基础。