花椒ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000760035

文献类型 期刊论文

文献题名 花椒ISSR-PCR反应体系的建立与优化

学科分类 220.45;经济林学

作者 汉素珍  王有科  李明  李岁成 

作者单位 甘肃农业大学林学院 

母体文献 生物学杂志 

年卷期 2011,28(5)

页码 30-33,5

年份 2011 

分类号 Q75 

关键词 花椒  ISSR-PCR  正交设计  单因子试验 

文摘内容 采用单因子试验和正交设计2种方法对影响花椒ISSR-PCR反应体系的4个因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP、引物)在3个水平上进行优化试验。选用L9(34)正交设计方案,从电泳结果中直观获得影响因素的最佳组合。单因子试验分别研究各影响因素不同含量对ISSR-PCR反应的影响情况,找出最佳反应水平。结果表明,适宜花椒ISSR-PCR反应的最佳体系为: 20μL的反应体系中,Taq酶1.0U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2mmol/L,引物1.0μmol/L,10×PCR buffer2.5μL,50 ng模板DNA,53℃退火,35个循环。