油桐ISSR-PCR最佳反应体系的建立

编号 zgly0000554577

文献类型 期刊论文

文献题名 油桐ISSR-PCR最佳反应体系的建立

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 李鹏  汪阳东  陈益存  张小平 

作者单位 安徽师范大学生命科学学院  中国林业科学研究院亚热带林业研究所  安徽师范大学生命科学学院  安徽芜湖  浙江富阳  安徽芜湖 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2008,(2)

年份 2008 

分类号 S794.3 

关键词 油桐  ISSR-PCR  单因子试验  正交设计 

文摘内容 在油桐遗传多样性研究中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,综合采用单因子试验和正交设计两种方法对影响油桐ISSR-PCR反应结果的4个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物)进行优化试验。单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响,找出最佳反应水平。正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析获得影响因素最佳反应水平。通过综合比较分析,最终建立了油桐ISSR-PCR反应的最佳反应体系,即在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol.L-1,dNTP 0.20 mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,1×PCR缓冲液,40 ng模板DNA。