二斑叶螨抗螺螨酯品系GST基因的克隆与表达分析

编号 zgly0001459737

文献类型 期刊论文

文献题名 二斑叶螨抗螺螨酯品系GST基因的克隆与表达分析

作者 吕娟娟  王进军  张寿芳  沈慧敏 

作者单位 甘肃农业大学草业学院  草业生态系统省部共建教育部重点实验室  中-美草地畜牧业可持续发展中心  西南大学植物保护学院  昆虫学及害虫控制工程重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2013年04期

年份 2013 

分类号 Q963 

关键词 二斑叶螨  抗螺螨酯品系  GST  基因克隆  表达量  荧光定量PCR 

文摘内容 【目的】揭示二斑叶螨Tetranychus urticae对螺螨酯的分子抗性机理。【方法】利用RT-PCR克隆了二斑叶螨的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因cDNA全长序列,采用生物信息学软件分析了克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析GST基因在二斑叶螨的螺螨酯抗性与敏感品系中的表达差异。【结果】克隆获得的谷胱甘肽-S-转移酶2个基因分别被命名为TuGSTd1和TuGSTd2(GenBank登录号分别为:KC445659和KC445660)。序列分析发现,TuGSTd1的开放阅读框长度为648bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.47kDa,理论等电点为5.49;TuGSTd2的开放阅读框为648bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.57kDa,理论等电点为6.33。系统发育分析表明这两个基因与桔全爪螨Panonychus citri Delta家族的GST基因的氨基酸序列一致性为93%。实时荧光定量PCR结果表明,TuGSTd1和TuGSTd2在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量分别为敏感品系的5.60和3.75倍。【结论】GST基因在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量均显著高于敏感品系,据此推测GST基因的过量表达可能与其对螺螨酯的抗性形成有关。