RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究

编号 zgly0001220673

文献类型 期刊论文

文献题名 RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究

作者 孔宝华  陈海如  常胜军  朱水芳  黄文胜  刘进元 

作者单位 云南省植物病理重点实验室!昆明650201  清华大学生命科学与工程研究院  农业部植物检疫实验所 

母体文献 植物检疫 

年卷期 2000年05期

年份 2000 

分类号 Q939.4 

关键词 李坏死环斑病毒  RT-PCR  检测  克隆 

文摘内容 为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒 (PNRSV) ,根据该病毒RNA 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总RNA进行RT PCR ,结果从感病组织中扩增出了大约 45 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到 pGEM T easy载体 ,转化大肠杆菌DH5 5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达 93.6 %) ,这表明应用RT PCR来检测李坏死环斑病毒是可行的 ;PCR产物克隆作为RT PCR反应的阳性对照解决了检疫对象不能扩散的问题 ,从而建立了RT PCR快速检测方法